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游离胆固醇(FC)含量测试盒(可见分光光度法)图片
产品货号:
SK132-2
中文名称:
游离胆固醇(FC)含量测试盒(可见分光光度法)
英文名称:
Free Cholesterol Assay Kit
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本制品是百奥莱博公司基于游离胆固醇氧化酶催化法开发的,专门用于组织、细菌、真菌、血清或血浆等样本中游离胆固醇(FC)含量的试剂盒。



背景资料:

游离胆固醇(FC)是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。



检测原理:

游离胆固醇氧化酶催化游离胆固醇生成△4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在500nm有吸收峰,其颜色深浅与游离胆固醇含量成正比。



产品组成:
组分规格
试剂二50mL
试剂三1支
试剂四1支

保存:2~8℃,有效期3个月。

用户自备:
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96孔板、异丙醇和蒸馏水。

注意事项:
  • 正式测定之前选择2~3个预期差异大的样本做预测定。
  • 若△A超过0.8,请进行适当的稀释后再进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
  • 测定管如产生白色浑浊,可将待测液用异丙醇稀释2~5倍测定


样本处理:
  • 组织样本:按照组织(g):异丙醇(mL)=1∶5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL异丙醇)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。
  • 细菌、真菌样本:先收集400~500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL异丙醇,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。
  • 血清(浆)样本:直接测定。


操作步骤:
  • 分光光度计预热30min,调节波长到500nm,蒸馏水调零。
  • FC工作液的配制:临用前,吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一个月。
  • 测定管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待测液和900μL FC工作液,混匀,37℃静置1h后于500nm测定A测定管
  • 空白管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL异丙醇和900μL FC工作液,混匀,37℃静置1h后于500nm测定A空白管


计算公式:
标准条件下回归方程为y = 0.8266x - 0.0104,R2 = 0.9997。
其中x为胆固醇浓度(μmol/mL),y为吸光值△A=A测定管-A空白管
  • 血清(浆)样本:
    FC(μmol/mL)=(△A+0.0104)÷0.8266 =1.21×(△A+0.0104)

  • 组织样本:
    • 按样本蛋白浓度计算
      FC(μmol/mg prot)=(△A+0.0104)÷0.8266×V1÷(V1×Cpr)=1.21×(△A+0.0104)÷Cpr

    • 按样本质量计算
      FC(μmol/g鲜重)=(△A+0.0104)÷0.8266×V1÷(W×V1÷V2)=1.21×(△A+0.0104)÷W

  • 细胞、细菌样本:
    FC(μmol/104 cell)=(△A+0.0104)÷0.8266÷(500×V1÷V2)=0.0024×(△A+0.0104)÷W

V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500万。
相关搜索:游离胆固醇(FC)含量测试盒(可见分光光度法)游离胆固醇检测Free Cholesterol Assay Kit
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